Выбор начинается с красителя или зонда
Выбор флуоресцентного фильтра начинается с красителя или зонда, используемого в вашем анализе, а не с длины волны, которую вы не подтвердили. Документированный список красителей и зондов для флуоресцентных фильтров: FAM, SYBR Green, Green, HEX, TET, Cy3, JOE, ROX, Cy3.5, Texas Red, Cy5, LC Red640 и Cy5.5, а также другие позиции в том же документированном списке. Если в вашем анализе используется название из этого списка, выбор можно проводить по документированным примерам возбуждения и эмиссии. Если в вашем анализе используется название вне этого списка, выбор нельзя проводить на основе предположения: укажите это название в запросе и спросите, охвачено ли оно.
От красителя или зонда к возбуждению и эмиссии
Каждый краситель или зонд имеет характеристики возбуждения и эмиссии. Документированные примеры возбуждения и эмиссии для флуоресцентных фильтров: Ex 470-30 / Em 525-20, Ex 523-20 / Em 564-20, Ex 543-20 / Em 584-20, Ex 571-20 / Em 612-20 и Ex 628-35 / Em 692-45 при перекрёстном блокировании более 6. Эти примеры показывают форму, в которой приводятся значения возбуждения и эмиссии, и позволяют покупателю сравнить требование с документированным примером. Они не охватывают все красители и зонды и не заменяют подтверждение в запросе. Таким образом, этап выбора представляет собой этап сопоставления: сопоставьте ваш краситель или зонд с документированным списком, сопоставьте ваши требования к возбуждению и эмиссии с документированным примером, где он есть, и запросите подтверждение, если ни один пример не подходит.
Блокирование, крутизна и состав набора
После возбуждения и эмиссии следующими факторами выбора являются блокирование и крутизна. Блокирование документировано как оптическая плотность более 6 в диапазоне 200–900 нм или 200–1200 нм при перекрёстном блокировании оптической плотностью более 6. Крутизна документирована как переход от 50 процентов до оптической плотности 5 менее чем за 10 нм. Эти значения важны, поскольку при флуоресцентных измерениях регистрируется слабая эмиссия на фоне сильного возбуждения: рассеянный свет возбуждения не должен попадать в тракт детектора, а переход между областью пропускания и областью блокирования должен быть достаточно крутым, чтобы разделять их. Покупателям, которым нужен показатель блокирования или крутизны для другого диапазона длин волн, следует указать этот диапазон в запросе и запросить подтверждение. Наконец, определите, нужны ли вам отдельные элементы или склеенный набор фильтров. Несколько элементов могут быть склеены в набор флуоресцентных фильтров, что подходит для применений, где фильтр возбуждения, эмиссионный фильтр и связанные элементы должны работать как единый узел. Укажите необходимые элементы и краситель или зонд, которому служит каждый из них.
Выбор по применению
Применение определяет выбор двумя способами. Во-первых, важна группа приборов: документированными группами применения являются системы биомедицинского флуоресцентного анализа и приборы для количественной ПЦР в реальном времени, а группа ПЦР охватывает молекулярную биологию, тестирование безопасности пищевых продуктов и эпидемиологический мониторинг общественного здоровья. Во-вторых, важен сам анализ: используемый краситель или зонд определяет, какой пример возбуждения и эмиссии является релевантным. Руководство по флуоресценции в ПЦР охватывает прикладную сторону, а страница флуоресцентных фильтров содержит полное подтверждение спецификации. Заметка о выборе красителя подробнее объясняет выбор по названию красителя и зонда.
Контрольный список выбора
Пожалуйста, подтвердите в вашем запросе следующие пункты перед заказом: название красителя или зонда; требования к возбуждению и эмиссии; необходимый диапазон блокирования; необходимый размер из документированных размеров или требуемый вами размер; нужны ли вам отдельные элементы или склеенный набор фильтров; а также количественные условия и условия поставки для вашего заказа.